农作物论文_烟草TCTP基因克隆与生物信息学分析
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 RNA的提取与反转录
1.2.2 烟草TCTP基因克隆
1.2.3 生物信息学分析
1.2.4 TCTP基因相对表达量
2 结果与分析
2.1 烟草TCTP扩增
2.2 烟草TCTP蛋白理化性质分析
2.3 烟草TCTP蛋白疏水性/亲水性
2.4 烟草TCTP蛋白翻译后修饰位点分析
2.4.1 烟草TCTP蛋白磷酸化位点分析
2.4.2 烟草TCTP蛋白糖基化位点分析
2.5 烟草TCTP蛋白二、三级结构分析与保守结构域分析
2.5.1 烟草TCTP蛋白二、三级结构
2.5.2 烟草TCTP蛋白保守结构域
2.6 烟草TCTP蛋白进化分析
2.7 “NC95”与“SY04-3”不同时期未接种与接种TCTP基因的表达分析
3 讨论与结论
文章摘要:翻译控制肿瘤蛋白(translational controlled tumor protein.TCTP)广泛分布在真核生物中,其表达在翻译和转录水平上受控制。近年来,在植物中对TCTP研究集中在植物生长与抗逆性方面。该试验以PVY高感品种"NC95"和高抗品种"SY04-3"为材料,克隆TCTP基因,并进行生物信息学以及相对表达量分析。结果表明:从"SY04-3"和"NC95"中分离出来的TCTP基因均包含507 bp的ORF,二者基因序列存在7处碱基突变,但均编码168个氨基酸,氨基酸序列存在1个区别。通过生物信息学分析显示,"SY04-3"和"NC95"分子量分别是18 782.16和18 773.06 kD,等电点分别是4.33和4.25。通过对氨基酸分析发现,TCTP蛋白为非跨膜亲水性蛋白,无信号肽,可能定位在细胞质,属于TCTP家族蛋白,"SY04-3"和"NC95"分别有13个和14个磷酸化位点,二者均有1个糖基化位点,进化分析显示与辣椒和茄子的亲缘关系最近。
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