【作 者】：网站采编
【关键词】：
【摘 要】：文章目录 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.2 实验方法 1.2.1 植物材料培养 1.2.2 提取总RNA及c DNA合成 1.2.3 选择内参基因及设计引物 1.2.4 PCR扩增及扩增效率分析 1.2.5 实时荧光定量PCR 1.3 数据处理

文章目录

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法

    1.2.1 植物材料培养

    1.2.2 提取总RNA及c DNA合成

    1.2.3 选择内参基因及设计引物

    1.2.4 PCR扩增及扩增效率分析

    1.2.5 实时荧光定量PCR

1.3 数据处理与分析

1.4 验证内参基因的可靠性

2 实验结果

2.1 总RNA质量验证与引物特异性评价

2.2 内参基因Ct值表达谱分析

2.3 候选内参基因表达稳定性分析

    2.3.1 ge Norm软件分析

    2.3.2 Norm Finder软件分析

    2.3.3 Best Keeper软件分析

2.4 验证内参基因稳定性

3 讨论

文章摘要:实时荧光定量PCR作为研究基因表达的重要手段,在操作过程中需要内参基因作校正与标准化。本文以绿豆（Vigna radiata）野生型‘苏绿1号’（苏绿）及其突变体08 （08）为材料,采用实时荧光定量PCR技术分析6个候选内参基因（EF1α、TUA、TUB、CHS、GADPH、Actin）在不同品种、不同部位（根、茎、叶）及镉诱导前后的表达趋势,继而利用geNorm、NormFinder和BestKeeper这三款软件对候选内参基因的表达稳定性进行综合分析,最后利用目的基因Nramp5进行验证。实验结果表明, Actin与TUA是所有样品中表达最稳定的内参基因, CHS表达稳定性最差。本研究为将来绿豆基因表达分析的相关研究提供了参考。

文章关键词:

项目基金: